SERO-EPIDEMIOLOGICAL STUDY OF CHRONIC RESPIRATORY DISEASE IN CHICKEN FLOCKS IN SYRIA

SERO-EPIDEMIOLOGICAL STUDY OF CHRONIC RESPIRATORY DISEASE IN CHICKEN FLOCKS IN SYRIA

EYAD ALNAJJAR^*; MOHAMMAD ALI EL-EMADI^** and YASER ALOMAR^***

^* Student, Dept. of Animal Diseases, Vet. Med.HamaUniversity.

^** Professor in Poultry Disease, Vet. Med.HamaUniversity.

^*** Associated Professor in Epidemiology, Vet. Med.HamaUniversity.                                  

Email: eyadvet@hotmail.com

دراسة وبائية مصلية للمرض التنفسي المزمن فيقطعان الدجاج في سورية

إياد النجار^*، محمد علي العمادي^** ،  يـاسـر العمـــــر^***

*: طالب دکتوراه – قسم أمراض الحيوان – کلية الطب البيطري- جامعة حماة

**: أستاذ أمراض الدواجن- قسم أمراض الحيوان – کلية الطب البيطري- جامعة حماة

*** أستاذ الوبائيات المساعد- قسم أمراض الحيوان -کلية الطب البيطري - جامعة حماة

Email: eyadvet@hotmail.com

جمعت 2990 عينة دم من طيور دجاج اللحم والبياض وأمات الفروج بأعمار مختلفة من مختلف مناطق الجمهورية العربية السورية لاستخدامها في اختبارات التراص المصلي السريع واختبارات المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم للکشف عن المفطورة التنفسية، سجلت الدراسة انتشارا مصليا للحالات الإيجابية باستخدام التراص المصلي السريع 33% عند أمات الفروج و1% عند دجاج اللحم و43% عند البياض وبانتشار مصلي عام 24% وباستخدام اختبارات المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم فقد سجلت الدراسة قيم انتشار مصلي 27% عند الأمات و8% عند دجاج اللحم و 33% عند البياض وانتشارا مصليا عاما 19%. جلت الدراسة فروقات معنوية واضحة بين الانتشار المصلي للمرض عند طيور دجاج اللحم بالمقارنة مع الأمات والبياض سواء باستخدام تقنية التراص المصلي السريع أو المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم (p=0.00000) ولم تکن هناک أية فروقات معنوية في قيم الانتشار المصلي بين دجاج البياض أو الأمات باستخدام کلا الاختبارين (p>0.05)، وسجلت الدراسة قيم انتشار مصلي مرتفع في کل من منطقة المبارکات ومناطق دمشق مقارنة مع بقية مناطق الدراسة وبفروقات معنوية واضحة جدا (p=0.00000).

کلمات مفتاحية: مفطورة تنفسية– اختبار التراص السريع – رشح مزمن

INTRODUCTION

مقــدمـة

يعد مرض الرشح المزمن الذي تسببه المفطورة التنفسية (مايکوبلازما غاليسيبتکم) من أخطر الأمراض التي تسبب خسائر اقتصادية کبيرة في قطاع الدواجن، وتعد جراثيم المايکوبلازما غاليسيبتکم من أصغر وأبسط الأنواع الجرثومية والمعروفة بعدم وجود الجدار الخلوي وتترکز إمراضيتها عند طيور الدجاج والحبش بإحداثها أخماجاً في القناة التنفسية في جميع أنحاء العالم (Kleven, 1997).

وعلى الرغم من أن الإمراضية الأساسية للمايکوبلازما ما تزال غير معروفة, إلا أن معظم الضرر الذي تحدثه أخماجها في کل من الإنسان والحيوان ينجم عن استجابة مناعة الثوي للالتهاب وذلک لوجود تأثيرات سمية مباشرة ناجمة عن العوامل الضارية للمايکوبلازما (Razin et al., 1998).

وأشار الباحث (Ley, 2003) إلى أن المايکوبلازما غاليسيبتکم تصيب في الحالات الطبيعية کل من طيور الدجاج والبط والحمام والحجل والفري وتسبب المرض التنفسي المزمن، وتکون الصيصان حساسة جداً للإصابة بهذا المرض من عمر ثلاثة أسابيع حتى خمسة أشهر ويزداد تأثيرها بشکل خاص عند البلوغ الجنسي (بدء عملية البيض) کما تعد العروق ذات الصفات الوراثية العالية أشد تعرضاً للإصابة وتعتبر الطيور المصابة المصدر الرئيسي للعدوى عن طريق البيض المنتج الملوث إذ أن الطيور المصابة تضع البيض الملوث بشکل متقطع طيلة فترة حياتها الإنتاجية وتبلغ نسبة التلوث من 8-30% بين الأجنة ومن 9-20% بين الصيصان بعمر يوم واحد، وتکمن خطورة العدوى بهذا المرض في أن الطيور السليمة سريرياً تنتج بيضاً ملوثاً وتعتبر مصدراً للعدوى، کما ينتشر هذا المرض نتيجة الاحتکاک المباشر وذلک بواسطة الهواء عن طريق الجهاز التنفسي، وتعد المايکوبلازما أحد أکثر الأمراض المنقولة عن طريق البيض أهمية (Egg-borne diseases) وبالتالي فإن عملية العدوى في قطعان البياض أو الأمات يمکن أن تکون مدمرة اقتصاديا وذلک بسبب الخسائر المباشرة وغير المباشرة التي تحدثها خلال دورة الإنتاج.

تمتلک جراثيم المايکوبلازما ميزة خاصة وهي عدم قدرة الجهاز المناعي على التعرف عليها ضمن الثوي الحي, حيث أن الآلية الحيوية لبقائها درست من خلال ظاهرة التنکر أو التخفي الطبيعي الجزيئى (Molecular-mimicry) ومن خلال دراسة الأنماط الظاهرية (Phenotypes) وکذلک درجة لدونتها (Plasticity) والتي من خلالها تم التأکد أن الجهاز المناعي للثوي لا يتعرف عليها بشکل کامل (Markham et al., 1994 and Wren, 2000).

وبين (Rottem, 2003) أن هذه الظاهرة تشير إلى التوضع المستضدي السطحي والذي تتشارک فيه معظم أنواع المايکوبلازما وتعد عوامل کامنة لعدم مقدرة آليات دفاعات الثوي من التعرف عليها، وکون المايکوبلازما تتمتع بلدونة النمط الظاهري الأمر الذي يکسبها قدرة على التغير من نمط جيني مفرد (Single Genotype) إلى إحداث تعديلات مستضدية لأکثر من حالة شکلائية وفيزيزلوجية والتغير للاستجابة بسلوکها للظروف البيئية. وعلاوة على ذلک فإن الغشاء الليبوبروتيني (Lipoproteins) هو المکون التماسي للمايکوبلازما والذي يستطيع أن يقوم بتنشيط البلاعم الخلوية وبالتالي فهو يلعب دورا هاما في إنتاج السيتوکين (Cytokine) الذي ينجم عنه الاستجابة الالتهابية خلال فترة الخمج (Chambaud et al., 1999)، کما أن مقاومة العائل أو الثوي ونسبة انتشار الخمج تعتمد على عوامل عدة منها الجهاز المناعي وإنتاج الخلايا الليمفاوية البائية (B-Cells) والخلايا الليمفاوية التائية (T-Cells) (Siegel, 1994).

ويحدث تلف للخلايا الظهارية" للرغامى نتيجة إمرار فيروسات اللقاح أو من خلال فورمالين عملية التبخير أو وجود کميات من الأمونيا والغبار الذي يؤدي في النهاية إلى إحداث استجابة التهابية (Anderson et al., 1968 and Carlile, 1984). کما أن الحرکة الدائرية للخلايا الظهارية للرغامى تعمل کنظام تنظيف في الجزء العلوي من القناة التنفسية وتؤدي دورا هاماً في وقاية القناة التنفسية من الأخماج  ويلعب الهواء البارد دوراً في شل حرکة عمل هذه الخلايا فتنخفض آلية الوقاية المذکورة أعلاه ويزيد ذلک من قابلية الخمج في القناة التنفسية (Bradbury, 2001).

هذا ولم يتم دراسة المفطورة التنفسية دراسة وبائية کمية مصلية کافية، لذلک هدفنا من خلال هذه الدراسة إلى:

1 - تقييم الانتشار الوبائي لحالات مايکوبلازما غاليسيبتکم في مزارع الدجاج البياض والأمات ودجاج اللحم

2 - تحديد التوزيع الجغرافي الوبائي لانتشار مايکوبلازما غاليسيبتکم في مزارع الدجاج في سورية

MATERIALS and METHODS

المواد وطرائق البحث

جمع العينات Samples Collection

جمعت 2990 عينة دم عشوائياً من الوريد الجناحي (Wing vein) بأعمار مختلفة من طيور دجاج اللحم والبياض وأمات الفروج باستخدام محاقن سعة (5) مل لاستخدامها في اختبارات التراص المصلي واختبارات المناعة المرتبطة بالأنزيم (ELISA)، بهدف الکشف عن الأضداد النوعية للمايکوبلازما غاليسيبتکم وفي حالات خاصة أخذت عينات الدم من القلب مباشرة (Cardiac Pencture) حسب طريقة زندر (Zander, 1978).

ثم أفرغت کمية الدم في أنابيب عقيمة وأغلقت الأنابيب بسداداتها الخاصة ووضعت بشکل مائل أثناء نقلها إلى المخبر للمساعدة في عملية تخثر الدم، وعند وصول العينات إلى المخبر تم وضعها في الحضانة مدة ساعة وبدرجة حرارة 37 درجة مئوية، ثم ثفلت العينات بسرعة دوران 1500 دورة / الدقيقة مدة عشر دقائق ثم وضع المصل في أنابيب إبندروف عقيمة ومحکمة الإغلاق، ورقمت العينات باستخدام لصاقات خاصة سجل عليها رقم العينة ومصدرها وتاريخ أخذ العينة.

تمت الاستفادة من العينات الموجودة في بنک الأمصال في مخبر الخدمات البيطرية – مؤسسة الآغاخان وکذلک من بنک الأمصال في مخبر الوبائيات في کلية الطب البيطري- جامعة البعث، ويبين الشکل رقم (1) التوزيع التکراري لأعداد قطعان الدراسة.

الشکل رقم 1: التوزيع التکراري المطلق لأعداد قطعان الدراسة (فروج- بياض- أمات)

استخدمت تقنيات التراص المصلي السريع للکشف الأولي عن المايکوبلازما غاليسيبتکم ومن ثم تم اختبار نفس العينات باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم غير المباشر باستخدام المجموعات التشخيصية من شرکة بيوتشک – الولايات المتحدة الأمريکية (BioCheck)، وتم اتباع بروتوکول الشرکة المصنعة في کافة مراحل الکشف عن الأضداد النوعية للمايکوبلازما غاليسيبتکم بداية باستخدام التراص المصلي السريع ومن ثم باستخدام تقنية المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم لکافة عينات الدراسة والتي شملت 22 منطقة توزعت على 173 قطيعا خلال فترة الدراسة موزعة على مختلف مناطق القطر العربي السوري.  

وقدر الانتشار المصلي حسب کل من الباحثين (Martin et al., 1987) and (McNeil, 1998) و (Alomar, 2000).

وتمت مقارنة نتائج نسب الانتشار المصلي بين أنماط التربية في الدراسة وبين منطقة وأخرى باستخدام اختبار بيرسون مربع کاي (Pearsons Chi Square)، وتم تحليل النتائج باستخدام نظم التحليل الأمريکي (Analytical Software, 2002)

RESULTS

النتـائـج

يبين الجدول رقم (1) نتائج الحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم باستخدام اختبار التراص السريع المصلي حسب نوع التربية ، کما يبين الشکل رقم (2) التوزيع التکراري المطلق للحالات الايجابية باستخدام اختبار التراص السريع المصلي حسب نوع التربية.

الجدول رقم 1: نتائج الحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم باستخدام اختبار التراص السريع المصلي حسب نوع التربية

الشکل رقم 2: التوزيع التکراري المطلق للحالات الإيجابية باستخدام اختبار التراص السريع المصلي حسب نوع التربية:

الجدول رقم 2: نتائج الحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم حسب نوع التربية:

الشکل رقم 3: التوزيع التکراري المطلق للحالات الإيجابية باستخدام اختبار المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم:

جدول رقم 3: التوزيع النسبي لحدوث الحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم باستخدام تقنية التراص السريع المصلي لکافة أنماط التربية وحسب المنطقة الجغرافية

جدول رقم 4: التوزيع النسبي لحدوث الحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم باستخدام تقنية الاليزا الغير مباشرة لکافة أنماط التربية حسب المنطقة الجغرافية

الشکل رقم 4: التوزيع النسبي لانتشار الحالات الإيجابية للمفطورة التنفسية حسب المنطقة الجغرافية في الدراسة وباستخدام تقنية الإليزا غير المباشرة

التحليل الإحصائي ونموذج ريد فروست الوبائي

من الجداول المذکورة أعلاه واستخدام اختبارات بيرسون مربع کاي (Pearson’s Chi Square) سجلت الدراسة فروقات معنوية واضحة بين الانتشار المصلي لطيور دجاج اللحم بالمقارنة مع الأمات والبياض سواء باستخدام تقنية التراص المصلي السريع أو المقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيم (p=0.00000) ولم تکن هناک أية فروقات معنوية في قيم الانتشار المصلي بين دجاج البياض أو الأمات باستخدام کلا الاختبارين (p>0.05).

وسجلت الدراسة قيم انتشار مصلي مرتفع في کل من منطقة المبارکات ومناطق دمشق مقارنة مع بقية مناطق الدراسة وبفروقات معنوية واضحة جدا (p=0.00000).

وباستخدام معطيات الدراسة الوبائية واستخدام نموذج ريد فروست الرياضي (Noordhuizen et al., 1997) فقد تمت دراسة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم بالترافق مع کثافة الطيور في المتر المربع الواحد باستخدام نظم التحليل الوبائي، حيث تم مقارنة الانتشار المصلي للحالات الإيجابية ضمن المساحات المربعة 9 طيور بالمتر المربع الواحد و18 طيرا بالمتر المربع الواحد و27 طيرا بالمتر المربع الواحد وذلک في ستة قطعان من قطعان الدراسة في مزارع قطعان البياض, حيث وجد أن الانتشار المصلي للحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم أکثر انخفاض عنه في المزارع التي کانت تربى فيها 9 طيور بالمتر المربع الواحد مقارنة مع تلک المزارع التي کانت تربى فيها 18 طيرا أو 27 طيرا في المتر المربع الواحد، وبشکل رياضي طردي  تم التکهن في نموذج ريد فروست الوبائي بأن الانتشار المصلي للحالات الإيجابية يزداد بمقدار10% في تلک المزارع التي کانت تربى فيها 18 أو 27 طيرا في المتر المربع الواحد مقارنة مع تلک المزارع والتي کانت تربى فيها 9 طيور في المتر المربع الواحد، کما يبين الشکل رقم (5).

الشکل رقم 5: علاقة کثافة التربية مع الإصابة بالمايکوبلازما غاليسيبتکم

DISCUSSION

المناقشــة

سجلت نتائج الانتشار المصلي للحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم قيما أقل مما سجلته الدراسات السابقة في دول الجوار وخاصة منها المملکة الأردنية سواء في قطعان الدجاج اللاحم أو البياض أو أمات دجاج اللحم حيث سجلت قيما تراوحت بين  56.25 % و 68.75 % ووصلت في بعض القطعان إلى 100 % کحالات إيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم (Roussan et al., 2006).

 کما لم تتوافق نتائج الانتشار المصلي سواء في قطعان دجاج اللحم أو قطعان البياض أو أمات دجاج اللحم مع العديد من دول آسيا أو العالم الغربي حيث سجلت قيم انتشار مصلي وصل إلى 73 % في قطعان البياض في جنوب ولاية کاليفورنيا في الولايات المتحدة الأمريکية (Southern California, USA  ) (Mohammed et al., 1986) وفي دولة أرکوا وفينزويلا (Aragua state and Venezuela) فقد سجل انتشار مصلي للحالات الايجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم في کل من الدجاج البياض وأمات الفروج انتشارا على التوالي 59 % و 66%  (Goody et al., 2001)، وسجل انتشار مصلي مرتفع أيضا في دجاج اللحم في جمهورية منغوليا (Mongolia) وصل إلى  53% (Zhang et al., 2001) و47.5 % في مدينة زاريا في نيجريا (Abdu et al., 1993)، ووصل الانتشار المصلي للحالات الإيجابية أيضا في جمهورية کرواتيا  (Zelenika et al., 1999) من 19-13% ، ويعود هذا الإختلاف في قيم الانتشار المصلي للحالات الإيجابية للمايکوبلازما غاليسيبتکم إلى مدى إختلاف نظم التربية بين مزرعة وأخرى وبين دولة أو منطقة وأخرى والذي يعتمد أساسا على مدى استخدام إجراءات التحکم والوقاية من هذا المسبب المرضي والتي يقع على رأسها استخدام التحصين وفترة التحصين وانتشار الوباء في کل منطقة وأخرى.

وقد توافقت نتائج الدراسة مع الدراسة العلمية السابقة من حيث دراسة العامل الوبائي والذي يمکن أن يساهم في زيادة انتشار المسبب المرضي وهو کثافة التربية وهذا يعد عنصرا هاما من الناحية الوبائية, وهو يؤثر على خصائص المنحنى الوبائي للمايکوبلازما غاليسيبتکم (McMartin et al., 1987)، حيث أن کثافة التربية المستخدمة في جنوب افريقيا تقارب 22 طائرا في المتر المربع الواحد وهي مساحة صغيرة مقارنة مع أعداد الطيور حيث يجب أن يقل العدد عن 10 طيور بالنسبة للمتر المربع الواحد و إلا فإن هذا سوف يؤدي إلى ارتفاع سريع في نشر الخمج للمايکوبلازما غاليسيبتکم بين طيور القطيع حسب ما أورده الباحثون المذکورون أعلاه وهذا ما أثبتته دراستنا.

نستنتج مما سبق أن المايکوبلازما غاليسيبتکم سجلت انتشار مصليا مرتفعا نوعا ما في کل من الدجاج البياض وأمات دجاج اللحم وهذا يقودنا إلى أن خفض قيم الانتشار هذه تندرج ضمن تطبيق إجراءات الأمن الحيوي الصارمة التي تحد من مخاطر کل من الاتصال العمودي والأفقي للمرض بينما يعد التحصين والإجراء العلاجي وسائل مباشرة أکثر نوعية لخفض مخاطر العدوى العمودية، وهکذا فإن الترکيز النوعي لهذه الإجراءات يقودنا إلى تطبيق برامج مناطرة (Monitoring Systems Programs) متتابعة ومکثفة للمرض (Collett, 2005).

REFERENCES

المراجــع

Abdu, P.A.; Bishu, G.; Adysiyun, A.A. and Adegboye, D.S. (1993): Survey for Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma Synoviae antibodies in Chicken in Saria, Nigeria. Journal of Animal Production Research, 3: 63-69.

Alexander, D.J. (1997):Newcastle Disease and Other Avian Paramyxoviridae Infections. In Diseases of Poultry, pp. 541-569. Edited by B. W. Calnek, Ames, Iowa State University Press.

Alomar, Y. (2000): Epidemiological methods to estimate the impact of production diseases in dairy herds. Ph. Thesis, Reading University, UK.

Analytical software, (2002): Statistix, version 4.0. Windows Version. United State of America.

Bradbury, J.M. (2001): Avian Mycoplasmas. In: Poultry Diseases, Fifth Edition, Jordan F., Pattison M., Alexander D. & Faragher T., eds. W.B Saunders, London, UK, 178-193.

Carlile, E. S. (1984): Amonia in Poultry Science Journal, 40: 99-113.

Chambaud, I.; Wroblewski, H. and Blanchard, A. (1999): Interactions between Mycoplasma Lipoproteins and the Host Immune System. Trends Microbiol 7: 493-499.

Collett, S.R. (2005): Monitoring Broiler Breeder Flocks for Mycoplasma Gallisepticum after Vaccination with tS-11. MSc Thesis. Department of Production Animal Studies, Faculty of Veterinary Science, University of Pretoria.

Godoy, A.; Andre, L.F.; Colmenares, O.; Bermudez, V.; Herrera, A. and Munoz, N. (2001): Prevalence of Mycoplasma gllisepticum in egg-laying hens. Veterinary Tropical Journal, 26: 25-33.

Kleven, S.H. (1997): Mycoplasma synoviae infection. In: Calneck BW, Barnes HJ, Beard CW, MacDougald LR and Saif YM. (eds) Diseases of Poultry. 9th edition. IowaStateUniversity Press, Ames, pp 220-228.

Ley, D.H. (2003): Mycoplasma Gallisepticum Infection. In: Diseases of Poultry, Eleventh Edition, Saif Y.M., Barnes H.J., Glisson J.R., Fadly A.M., McDougald L.R. & . Swayne D.E., eds. IowaStateUniversityPress, Iowa, USA, 722-744.

Markham, P.F.; Glew, M.D.; Sykes, J.E.; Bowden, T.R.; Pollocks, T.D.; Browning, G.F.; Withear, K.G. and Walker, I.D. (1994): The Organization of the Multigene Family which Encodes the Major Cell Surface Protein pMGA, of Mycoplasma gallisepticum. FEBS Lett 352:347-352.

Martin, W.S. Meek, H.A. and Wille, P.W. (1987): Veterinary Epidemiology .first Edition. Iowa state University, Press, Ames, Iowa50014, P343.

McMartin, D.A.; Khan, M.I.; Farver, T.B. and Christie, G. (1987): Delineation of the Lateral Spread of Mycoplasma Gallisepticum Infection in Chicken. Avian Diseases, 31: 814-819.

McNeil, D. (1998): Epidemiological research methods. Johon Wiley & Sons Ltd. UK.

Mohammad, H.O.; Carpenter, T.E.; Yamamoto, R. and McMartin, D.A. (1986): Prevalence of Mycoplasma Gallisepticum and M. Synoviae in commercial layers in Southern and Central California. Avian Diseases, 30: 519-526.

Noodhuizen, J.P.T.M.; Frankena, K.; Van der Hoofd, C.M. and Graat, E.A.M. (1997): Application of Quantitative Methods in Veterinary Epidemiolopgy. Wageningen Pres, USA, P-247-269

Razin, S.; Yogev, D. and Naot, Y. (1998): Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas. Microbiol Mol Biol. Rev., 62:1094-1156.

Rottem, S. (2003): Interaction of Mycoplasmas with Host Cells. Physiol. Rev. 83: 417-423.

Roussan, D.A.; Abu-Basha, E.A. and Haddad, R. (2006): Control of Mycoplasma Gallisepticum Infection in Commercial Broiler Breeder Chicken Flocks Using Tilmicosin (Provitil Powder ®) Oral Formulation. International Journal of Poultry Science, No. 5, Vol. 10.

Wren, B.W. (2000): Microbial Genome Analysis: Insights into Virulence Host Adaptation and Evolution. Nat. Rev. Genet, 1:30-39.

Zelenika, T.A.; Savic, V. and Balenovic, M. (1999): Mycoplasmosis in heavey hybrid hens in Croatia from 1993 to 1998 Stocarstvo, 5: 411-418.

Zhang, J.H.; Bi, D.R.; Wang, M.H.; Han, B. and Gao, A.X. (2001): Prevalence and pathogenicity of Mycoplasma gallisepticum in broilers in Inner Mongolia. Chin. J. Vet. Sci. Tec., 31: 12-13.