DETECTION OF BOVINE ADENOVIRUSE-3 (BAV-3) FROM CALVES IN NINEVEH PROVINCE

Assiut University web-site: www.aun.edu.eg

DETECTION OF BOVINE ADENOVIRUSE-3 (BAV-3) FROM CALVES IN NINEVEH PROVINCE

ABDULHAKIM AMER SHEET and SAFWAN YOUSUF ALBAROODI

¹ Department of Microbiology, Collage of Veterinary Medicine, University of Msoul, Msoul, Iraq

² Department of Preventive and Internal Medicine, Collage of Veterinary Medicine,

University of Msoul, Msoul, Iraq

Received: 22 January 2019;     Accepted: 16 February 2019

الکشف عن الفايروس الغدي البقري البقري النمط -3- في عجول محافظة نينوى

عبد الحکيم عامر شيت ، صفوان يوسف البارودي

کلية الطب البيطري - جامعة الموصل العراق

E-mail: laythalkattan@yahoo.com      Assiut University web-site: www.aun.edu.eg

تم تجمع (200), عينة دم للحصول على المصل , , من 200 حيواناً وبمختلف الأعمار والمناشيء ، وذلک بهدف التقصي عن أضداد ومستضدات الفيروس الغدي البقري النمط-3-  وتحديد نسبة الإصابة وعلاقتها بالعمر والعلامات السريرية, وذلک باستخدام اختبار الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم الغير مباشر، بينت نتائج اختبار الممتز المناعي المرتبط بالانزيم للکشف عن الاضداد المتخصصة للفايروس أن نسبة الإصابة الإجمالية کانت 28% , وان اعلى نسبة اصابة کانت للفئات العمرية 6-9 اشهر (53,3%) في حين کانت اقل نسبة اصابة للعجول اکبر من سنة ونصف -2- سنة (19,4%) وبوجود فروقا معنوية واضحة بين المجموعة الاصغر سناً مع بقية المجاميع , بينت نتائج الدراسة ان شدة الاصابة وحسب المعايير المستخدمة لاحتسابها والواردة في تعليمات الشرکة المصنعة للاختبار, ان اعلى نسبة لشدة الاصابة والمعلمة بالرمز (++++) کانت في الفئات العمرية الاصغر سنا مقارنة ببقية المجاميع حيث بلغت (22,2%) کذلک تبين ان اعلى نسبة اصابة واشدها في الحيوانات المستوردة (31,6%) من المحلية منها (17,7%) وبفروق معنوية واضحة.

INTRODUCTION

المقدمــــــة

ينتمي الفيروس الغدي البقري النمط -3Bovine adenoviruse type 3 (BAV-3) إلى جنس Mastadenovirus من عائـلة Adenoviridae  (Zhang et al., 2017) ويصنف إلى عشرة أنماط مصلية (Anderson and Rings., 2009). اذ تنتمي الأنماط المصلية BAV-1, 2, 3, 9 and 10  ، إلى جنس Mastadenovirus ، بينما الأنماط المصلية  BAV-4, 5, 6,7 and 8

تنتمي إلى جنس Adenovirus  .(Kulshreshtha., 2009) تنقسم هذه الأنماط المصلية العشرة للفايروس إلى مجموعتين فرعيتين

Corresponding author: Dr. ABDULHAKIM AMER SHEET

E-mail address: laythalkattan@yahoo.com     

Present address:Department of Microbiology, Collage of Veterinary Medicine, University of Msoul, Msoul, Iraq

على أساس الاختلافات في خصائصها البيولوجية والمصلية اذ تنتمي الأنماط المصلية 1 و 2 و 3 و 9 إلى الفئة الفرعية رقم 1 وتنمو بشکـل جيد نسبياً في خطـوط خـلايا الزرع الخلـوي Reddy et al., 1999)).  وعلى الرغم مـن أن العـدوى غالبـاً مـا تکون تحت السريرية. إلا ان عـدوى الفيـروس مرتبـط أيضًا بالتهاب الملتحمـة حيث تـؤدي إلى إصابات خطيرة ووفيات في العـجول المثبطـة للمناعـة  Gras et al., 2017)) في عام 1959 تم عزل الفيروس الغدي البقري (BAdV) لأول مرة من الإفرازت التنفسية للابقار Makadiya., 2013)) وفي وقت لاحق عزل من الأغنام والجاموس ، والغزلان Mamadatokhonova., 2006)).  يتم استخدام التألق المناعي المباشرDFAT للکشف عن BAV3  Direct fluorescent antibody technique  Ali et al., 2016)) وتقنیة الممتز المناعي المرتبط بالإنزیم ELISA (Kale et al., 2013) ويشخص ايضا عن طريق العزل الفايروسي Mittal et al., 1996)) الفيروسات الغدية له القدره على إصابة أنواع مختلفه من المضائف وتتزايد بحدوث الاصابه.

ايضا عن طريق العزل الفايروسي Mittal et al., 1996)) الفيروسات الغدية له القدره على إصابة أنواع مختلفه من المضائف وتتزايد بحدوث الاصابه. وتسبب العديد من الامراض المتفشيه بين الإنسان والحيوان وتؤدي إلى أمراض تنفسية معدية أو امراض الجهاز المعوي، تؤدي أحيانًا إلى الموت (Hakhverdyan et al., 2016)  سجل المرض في ترکيا Kale et al., 2013)) وايران  Sakhaee et al., 2009)) وفي المملکة العربية السعودية

  Al-Hammadi and Hemida., 2014)) وايضا سجل المرض في سوريا  (Giangaspero et al., 1992 )

اهداف الدراسة

لغرض الکشف عن وجود الفيروس في عجول محافظة نينوى وضعت هذه الدراسة للاهداف التالية:

الکشف عن اضداد الفيروس الغدي البقري النمط -3 - من عجول الأبقار بواسطة اختبار الممتز المناعي المرتبط بالانزيم غير المباشر.

MATERIALS AND METHODS

المواد والطرائق

حيوانات الدراسة

تم خلال هذه الدراسة فحص 200 حيوانآ من العجول التي يتراوح اعمارها من 6 اشهر الى 2 سنة ومن مناطق مختلفة من محافظة نينوى کان البعض منه يعاني من علامات سريرية تمثلت بإفرازات انفية متباينة الشدة والنوع بينما کان المتبقي منها لا يعاني من اعراض سريرية تذکر.

جمع العينات:

عينات الدم

تم سحب عينات دم بواقع 8 مل من الوريد الوداجي ولمرتين بين کل مرة 3 اسابيع لغرض تاکيد الاصابة في الحيوانات وضعت في انابيب زجاجية غير حاوية على مانع التجلط ومن ثم ترکت مدة 15 دقيقة الى حين حصول تخثر بصورة تامة وبعد ذلک وضعت عينات الدم في جهاز الطرد المرکزي 2000 دورة لکل دقيقة لمدة 10 دقائق , جمع المصل ووضع في انابيب بندروف وتم حفظها في -30 درجة مئوية (Rai., 2005)

الاختبارات المصلية

تقنية الممتز المناعي المرتبط بالانزيم:

تم استخدام العدة التشخيصية المصنعةBio-X Diagnostics  حيث تم اجراء الاختبار حسب التعليمات الخاصة بالشرکة.

تقييم النتائج :

تم تقييم النتائج حسب ما تم ذکره في الملف المرفق مع عدة الاختبار حيث ان القراءة التي تزيد عن 0,6 تعد نتيجة ايجابية في حين ان القراءة التي هي اقل او تساوي 0,2 تعد النتيجة سلبية ولغرض تقييم مدى شدة الاصابة في العينات الموجبة تم حساب متوسط کل عينة موجودة في حفرتين مع حساب متوسط السيطرة الايجابية ايضآ ضمن المعادلة الاتية :

VAL =  X 100

وتم إحتساب شدة الاصابة حسب ما هو مرفق کالاتي :

إذا کانت النتيجة اصغر من 10 % تعتبر سالبة (-) . اذا کانت النتيجة اکبر من 10% تعتبر موجبة ويرمز لها (+), إذا کانت النتيجة اکبر من 33 % تعتبر موجبة ويرمز لها (++). إذا کانت النتيجة اکبر من 56 % تعتبر موجبة ويرمز لها (+++). إذا کانت النتيجة اکبر من 79 % تعتبر موجبة ويرمز لها (++++). إذا کانت النتيجة اکبر من 102 تعتبر موجبة ويرمز لها (+++++).

RESULTS

النتائــج

نتائج الاختبارات المصلية

نتائج التحري عن اضداد الفيروس الغدي البقري النمط-3- باستخدام اختبار الممتز المناعي المرتبط بالانزيم

الجدول 1: يبين نسبة الاصابة الاجمالية بالفيروس الغدي البقري النمط-3- في العجول ولمرتين متتاليتين من جمع العينات باستخدام اختبارالممتز المناعي المرتبط بالانزيم

الاختلاف في الاحرف ( a ,b) يعني وجود فرق معنوي تحت مستوى احتمال  (

بينت نتائج الفحص المصلي لفايروس الغدي البقري النمط-3- للعجول المستخدمة في الدراسة باستخدام تقنية الممتز المناعي المرتبط بالانزيم ان نسبة الاصابة الاجمالية بلغ % 28.5 بعد 21 يوم من الفحص الاولي والذي بلغ %24 ولم يلاحظ وجود فروق معنوية واضحة بين الفحصين. 

الجدول 2: علاقة العمر بالاصابة بالفيروس الغدي البقري النمط -3- باستخدام اختبار الممتز المناعي المرتبط بالانزيم.

الاختلاف في الاحرف ( a ,b) يعني وجود فرق معنوي تحت مستوى احتمال  (

بينت النتائج وجود فروق معنوية واضحة في معدلات الاصابة بالفيروس, حيث کانت اعلى نسبة اصابة في الفئات العمرية الاصغر سنآ (6-9) اشهر اذ بلغت %53.3 , وتناقصت النسبة المئوية للاصابة بتقدم العمر حيث بلغت اقل نسبة اصابة للفئة العمرية الاکبر من سنة ونصف الى 2 سنة وبفروق معنوية واضحة بيت الفئة الاعلى نسبة اصابة مقارنة ببقية المجاميع.

الجدول 3: نسبة شدة الاصابة بالفيروس الغدي البقري النمط-3- باستخدام اختبارالممتز المناعي المرتبط بالانزيم.

اظهرت نتائج الدراسة ان  شدة الاصابة وحسب المعايير المستخدمة لاحتسابها والواردة في  تعليمات الشرکة المصنعة للاختبار, ان اعلى نسبة لشدة الاصابة والمعلمة بالرمز (++++) کانت في الفئات العمرية الاصغر سنا مقارنة ببقية المجاميع حيث بلغت (%22,2) , في حين انعدمت نسبة الاصابة الشديدة والمعلمة بنفس الرمز (++++) في الفئات العمرية الاکبر من سنة ونصف الى 2 سنة (%0)

الجدول 4: علاقة منشأ العجول بالاصابة بفيروس الغدي البقري النمط  -3- باستخدام اختبارالممتز المناعي المرتبط بالانزيم

الاختلاف في الاحرف (a ,b) تعني وجود فرق معنوي تحت مستوى احتمال (

اظهرت النتائج وجود فروقآ معنوية واضحة في نسبة الاصابة بفيروس الغدي البقري النمط-3- بين العجول المستوردة والمحلية حيث کانت اعلى نسبة اصابة في العجول المستوردة بلغت (% 31.6) عند مقارنتها بالعجول المحلية

الجدول 5: يبين نسبة شدة الاصابة في الحيوانات المحلية والمستوردة باستخدام اختبار الممتز المناعي المرتبط بالانزيم.

الاختلاف في الاحرف ( a ,b) تعني وجود فرق معنوي تحت مستوى احتمال  ( 

کما اظهرت النتائج ان اعلى نسبة شدة اصابة المعلمة بالرمز(++++) کانت في الحيوانات المستوردة حيث بلغ ( 14,1%) في حين انعدمت شدة الاصابة في الحيوانات المحلية (0%)

DISCUSSION

المناقشة

تعد الاصابات التنفسية في الابقار والناجمة عن المسببات الفيروسية من اکثر المشاکل التي تواجه سلسلة الانتاج في المجترات الکبيرة , تلعب عوامل کثيرة دورا اساسيا في تطور هذه الاصابات منها الاجهاد الناجم عن النقل او العوامل المسببة لتثبيط الجهاز المناعي (Ceribasi et al., 2014), ومن ابرز المسببات الفيروسية واکثرها شيوعا فايروس الادينو البقري النمط-3- السنسيشيا التنفسية البقرية, البارا -انفلونزا النمط-3- والفايروس الحلئي البقري النمط-1- , ويعد فايروس الادينو البقري النمط-3- من اکثر انواع الفايروسات اهمية في هذه الاصابات حيث يحتل المرتبة الاولى او الثانية اهمية في العديد من دول العالم (Roshtkhari et al., 2012)

بينت نتائج الدراسة للتقصي عن نسبة الاصابة بفيروس الادينو البقري النمط -3- في العجول باستخدام تقنية الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم أن معدل الإصابة الاجمالية 28.5 % بعد 21 يوما من الفحص الاولي لها , وعند مقارنة هذه النسبة بدراسات مسبقة في العراق , اذ يتبين وجود فروق في النسبة الاجمالية للاصابة , حيث ذکر باحثون (Sinbat et al., 2016) ان نسبة الاصابة الاجمالية بلغت 57% في محافظة البصرة وباستخدام تقنية الممتز المناعي المرتبط بالانزيم , دراسات عديدة في الدول المجاورة للعراق وعلى مستوى العالم تناولت الانتشار الکبير لفيروس الادينو البقري النمط -3 , حيث اشار (Sakhaee et al., 2009) ان نسبة الاصابة الاجمالية بفايروس الادينو البقري النمط -3 100% وباستخدام تقنية الممتز المناعي المرتبط بالانزيم في محافظة کيرمان - ايران  , دراسة اخرى تناولت فيروس الادينو البقري النمط -3- اذ تبيـن ان نسبـة الاصابة 61.9% في ايران , فـي حين بلغـت نسبـة الاصـابة في  منطقة الشمال الشرقي لسـوريا 26.3 %  وباستخدام  اختبار التألق المناعي غير المباشر( Giangaspero et al.,1992) بينما اشار (Kale et al., 2013) ان نسبة الاصابة بفيروس الادينو البقري النمط- 3 في ترکيا بلغت 82.1% في موسم الصيف , وافقت نتائجنا في ارتفاع نسبة الاصابة بفيروس الغدي البقري النمط -3- للعديد من الدراسات الاخرى التي  تناولت نسبة الاصابة به مثل     ( Okur-Gumusova et al., 2007) حيث سجل نسبة اصابة 81.4% في ترکيا , في حين سجل Gurses., 2008)) نسبة اصابة 83.3% في ترکيا , باحثين اخرين شملت دراستهم الاصابات الفايروسية للجهاز التنفسي العلوي للابقار التي تبلغ اعمارها اکثر من سنة اذ تبين ان نسبة الاصابة بتلک الابقار 86% , دراسة مسحية اخرى للمسببات الفيروسية التنفسية في فرنسا وتناولت ايضا فايروس الادينو البقري النمط-3- اذ بلغت نسبة الاصابة 66.5% (Valarcher and Hagglund., 2006) في حين تناولت دراسة اخرى نسبة الاصابة بفايروس الادينو البقري النمط-3- وعلاقته بالفايروسات المسببة للاصابات المعوية في الابقار اذ بلغت نسبة الاصابة 97.3% في البرازيل وباستخدام اختبار التعادل ( Gras et al., 2017) ان الاختلاف في نسب الاصابة يعود لاسباب عديدة منها : الاختلاف في اعمار الحيوانات المستخدمة في الدراسات , الاختلاف في العتر الفيروسية ومدى شدة ضراوتها , الاختلاف في طبيعة التربية ونظمها , وجود اصابات ثانوية والتي تؤثر على نسبة الاصابة بشکل فاعل , شمولية بعض الدراسات للمسببات الفيروسية الاخرى المرافقة لفايروس االغدي النمط-3-  والمسببة للمرض التنفسي البقري Bovine Respiratory Disease (BRD) , طبيعة انتقاء الحيوانات واهداف کل دراسة ( Elvander et al., 1996) , دراسة اخرى في فنلندا تناولت المسببات الفايروسية والجرثومية للاصابات التنفسية للعجول ومن ضمنها فايروس الغدي البقري النمط-3- وتبين ان نسبة الاصابة 51% ولمرتين متتاليتين من جمع العينات من العجول ذاتها ( Hartel et al., 2004) .

بينت نتائج أن اعلى نسبة اصابة واکثرها شدة بفايروس الغدي البقري النمط-3- في الفئات العمرية الاصغر سنا ( 6-9 اشهر ) اذ بلغت 53.3% , وتناقصت النسبة المئوية للاصابة بتقدم العمر وباستخدام تقنية الممتز المناعي المرتبط بالانزيم , وعند البحث عن دراسات مناظرة لدراستنا لغرض المقارنة لم يتبين وجود دراسات تتطرق عن علاقة الاصابة بفيروس الغدي البقري النمط -3- بالعمر فيما عدا دراسة واحدة في ترکيا (Yavru et al., 2005) حيث صنف الحيوانات التي استخدمها في دراسته الى عجول وحيوانات بالغة واوجد ان نسبة الاصابة في البالغة اکبر من العجول وهيا لا تتوافق مع نتائج بحثنا ويعود هذا الاختلاف لاسباب عديدة منها: الاختلاف في مصدر الحيوانات حيث تم جمع العينات في البحث انف الذکر من مجازر الابقار وهذا بحد ذاته اختلاف جوهري , الاختلاف في طبيعة التربية ونظمها لکل بلد من البلدان , الاختلاف في شدة وضراوة العتر الفايروسية , الحالة المناعية للحيوانات , اما الدراسة الثانية في الهند حيث تناول الباحثين دراسة مصلية لنسبة الاصابة Goswami et al., 2017)) فقد اشارو ايضا الى ان الابقار الکبيرة اکثر من الصغيرة منها وقد اعزي السبب في ذلک الى ان الابقار الکبيرة تکون اکثر عرضة للاصابة من الصغيرة منها وان العجول اشهرها الاولى من اعمارها تقل فيها نسبة الاصابة نتيجة تناولها اللبأ الحاوي على الاضداد مما يقلل من فرصة اصابتها واعطاءها مناعة تقاوم فيها العديد من الاصابات التنفسية الفايروسية.

اظهرت النتائج ايضا ان اعلى نسبة اصابة واکثرها شدة کانت في العجول المستوردة مقارنة بالمحلية منها , ويعود السبب في ذلک الى اسباب عديدة منها الاجهاد التي تتعرض له الحيوانات المستوردة نتيجة النقل والذي بدوره يؤدي الى تنشيط الاصابة للعديد من الاصابات الفايروسية التنفسية والتي يمتلک الغالبية منها القابلية على تثبيط الجهاز المناعي مما يجعل الحيوانات عرضة للاصابات الفايروسية والجرثومية الاخرى مما يرفع من نسبة الاصابة , الاختلاف في طبيعة وضراوة العتر بين البلدان , مقاومة السلالات المحلية للعديد من الاصابات الفايروسية ( Sakhaee et al., 2009) , في حين بين الباحثين (Valarcher and Hagglund, 2006) ان سبب ارتفاع نسبة الاصابة خصوصا في الابقار المستوردة يعود الى الاجهاد , الازدحام والتماس المباشر اثناء النقل , التغير في المناخ فضلا عن ان طرح الفايروس اثناء الاصابة يتم عن طريق الافرازات الانفية والعين والبراز اذ تعتبر هذه الافرازات المصدر الرئيس للاصابة ، عوامل اخرى تلعب دورا في استحداث الاصابة بفايروس الادينو البقري النمط -3 في عجول التسمين  الا وهي استخدام الستيرويدات القشرية لما لها من دور في تثبيط الجهاز المناعي وتنشيط الاصابة وکذلک تلعب الاستجابة المناعية الخلطية والمتمثلة بالکلوبيولينات المناعية والخلايا اللمفية CD8+ دورا مهما في التصدي للاصابة الفايروسية خصوصا في المجرى التنفسي للحيوانات المصابة (Narita et al., 2003)

REFERENCES

المـراجـع

Anderson, D.E. and Rings, M.D. (2009): Current Veterinary Therapy Food Animal Practice, 5^th Ed. Saunders, St. Louis Mo..Pp: 179

Ali, O.C.; Songül, C. and Mustafa, O. (2016): Immunohistochemical detection of bovine herpesvirus type 1 and bovine adenovirus type 3 antigens in frozen and paraffi nized lung sections of pneumonic sheep and goats.Veterinarskiarhiv. 86(1): 9-21.

Al-Hammadi, M.A. and Hemida, M.G. (2014): Sero-Prevalence of Common Bovine Respiratory Viral Diseases In Saudi Arabia. Med. J.60(140).76-81.

Ceribasi, A.O.; Ozkaraca, M.; Ceribasi, S. and Ozer, H. (2014): Histopathologic immunoperoxidase and immunofluorescent examinations on natural cattle pneumonia originated from Parainfluenza type3, Respiratory Syncytial virus, Adenovirustype 3 and Herpesvirus type 1. Revue Méd. Vét.,165: 201-212.

Elvander, M. (1996): Severe respiratory disease in dairy cows caused by infection with bovine respiratory syncytial virus. Vet. Rec., 138: 101-105.

Giangaspero, M.; Vacirca, G.; Vanopdenbosch, E. and Blondeel, H. (1992): Epidimological survrey on viruse diseases of cattle in north Syria. Tropicul Tura.,10(2): 55-57.

Goswami, P.; Banga, H.S.; Mahajan, V.; Singh, N.D.; Deshmukh, S. and Brar, R.S. (2017): Detection of Multiple Antibodies and Risk Factor Association of Common Respiratory Viruses in the State of Punjab, India. Int. J.Curr. Microbiol. App. Sci., 6(3): 567-577.

Gurses, E. (2008): Sigirlarin viral solunum yolu enfeksiyonlarinin serolojik olarak arastirilmasi, University of Selçuk, Turkey, MSc. Thesis.

Gras, C.K.; Demoliner, M.; Eisen, A.K.A.; Spilki, FR. and Henzel, A. (2017):Seroprevalence of Bovine Adenovirus and Enterovirus Antibodies Reveals Different Infection Dynamics in Cattle Herds.Acta Scientiae Veterinariae.,45: 1-6.

Hakhverdyan, M.; Mamadatokhonova, M. and Belák, S. (2016): Development of a Taq Man Real Time PCR Assay for the Rapid Detection of Bovine Adenovirus Serotypes in Cattle. J. Vet Med Res 3(3): 1-7.

Hartel, H.; Nikunen, S.; Neuvonen, E.; Tanskanen, R.; Kivelä, SL.; Aho, R.; Soveri, T. and Saloniemi, H. (2004): Viral and bacterial pathogens in bovine respiratory disease in Finland. Acta Vet Scand 45: 193–200. http://dx.doi.org/10.1186/1751-0147-45-193.

Kale, M.; Ozturk, D.; Hasircioglu, S.; Pehlivanoglu, F. and Turutoglu, H. (2013): Some viral and bacterial respiratory tract infections of dairy cattle during the summer season. Acta Veterinaria (Beograd). 63. (2-3) 227-236.

Kulshreshtha, V. (2009):Molecular characterization of 33k protein of bovine adenovirus type 3. PHD Thesis. Department of Veterinary Microbiology, University of Saskatchewan. Saskatoon.

Makadiya, N. (2013): Functional Characterization Of 100K Protein of Bovine adenovirus type 3. MSc. Desseration. Department of Veterinary Microbiology, University of Saskatchewan. Saskatoon.

Mamadatokhonova, G. (2006): Detection of Adenoviruses in cattle. MSc. desseration. Faculty of Veterinary Medicine and Animal Science, Swedish University of Agricultural Sciences. Uppsala.

Mittal, S.K.; Middleton, D.M.; Tikko, S.K.; Prevec, L.; Graham, F.L. and babiuk, L.A. (1996): Pathology and immunogenicity in the cotton rat (sigmodon hispidus) model after infection with a bovine adenoviruse type 3 recombinant viruse expressing the firefly luciferase gene. Journal of General Virology.,77: 1-9.

Narita, M.; Yamada, M.; Tsuboi, T. and Kawashima, K. (2003): Bovine Adenovirus Type 3 Pneumonia in Dexamethasone-treated Calves. Vet Pathol 40: 128–135.

Okur-Gumusova, S.; Yazici, Z.; Albayrak, H. and Cakiroglu, D. (2007): Seroprevalence of bovine viral respiratory diseases, Acta Vet (Beograd), 57, 11-6.

Rai, A. (2005): Methods in Veterinary Virology, Indian Veterinary Research Institute, India, Pp: 50-52.

Reddy, P.S.; Idamakanti, N.; Chen, Y.; Whale, Babiuk, T.A.; Mehtali, M. and Tikoo, S.K. (1999): Replication-Defective Bovine Adenovirus Type 3 as an Expression Vector. Journal of Virology., 73 (11): 9137–9144.

Roshtkhari, F.; Mohammadi, G. and Mayameei, A. (2012): Serological evaluation of relationship between viral pathogens (BHV-1, BVDV, BRSV, PI-3V, and Adeno3) and dairy calf pneumonia by indirect ELISA. Trop Anim Health Prod ,41(3): 1105-1110.

Sakhaee, E.; Khalili, M. and Kazeminia, S. (2009): Serological study of bovine viral respiratory diseases in dairy herds in Kerman province Iran. Iranian Journal of Veterinary Research, Shiraz University.10(1): 49-53

Sinbat, S.A.; Al-Rodhan, A.M. and Othman, R.M. (2016): Molecular and Serological Detection of Bovine Adenovirus Type-3 In Basra Province. Basrah Journal of Veterinary Research.,15(3): 108-118.

Valarcher J.F. and Hagglund, S. (2006): Viral respiratory infections in cattle, Proceedings of XXIVth World Buiatric Congress, Nice, France, 384-97.

Yavru, S.; Simsek, A.; Yapkic, O. and Kale, M. (2005): Serological Evaluation of Viral Infections in Bovine Respiratory Tract. Acta Veterinaria., 55 (2-3): 219-226.

Zhang, P.; Xue, Q.; Ma, J.; Ren, J.; Xia, S.; Zhang, L.; Wang, W.; Tikoo, S.K. and Du, E. (2017): Bovine adenovirus type 3 virions cannot be rescued invivo after full-length viral genome transfection in the absence of detectable polypeptide IX.J. Vet Sci.,18(2):217-227.